染色体倍性分析服务

染色体倍性分析服务


      倍性育种,指通过改变染色体的数量,产生不同的变异个体,进而选择优良变异个体培育新品种。正常的配子细胞中所包含的染色体数或半数的体细胞染色体数称为一套单倍染色体,用符号n 表示。具有一个染色体组的细胞和由这样的细胞组成的个体称为单倍体(n) ,具有两个染色体组的细胞或个体称为二倍体(2n),具有两个以上整套染色体组的细胞或个体则称为多倍体,包括三倍体(3n)、四倍体(4n)等。

      传统的倍性鉴定主要采用常规压片法统计染色体数目,但采用这种方法很难寻找到分裂中期染色体分散良好并可进行计数的细胞,而且整个过程耗时长,检测效率低。采用流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)进行倍性分析的方法简化了倍性分析的过程,可以快速准确检测同一物种范围内不同倍性的样品。FCM作为一项快速、高效的检测技术,被广泛应用于细胞分类学、植物遗传学及植物生理学等研究领域中。FCM常被用于鉴定植物倍性水平,通过检测植株G0/G1峰的细胞核DNA含量可以判断出植物的倍性。

实验原理
      首先需要裂解液将组织中细胞核释放出来,并打开DNA链,然后用DAPI染液将细胞核DNA上的A-T碱基对特异性染色,再用仪器检测出被染色的A-T碱基对发出的荧光强度。比如二倍体的荧光强度是100(横坐标),那么单倍体的荧光强度就是50(横坐标)。纵坐标是细胞数量的显示,通常来说,信号峰高说明信号比较好,杂质少。

倍性=待测样本的峰值/参照物的峰值*参照物倍性
e.g. 100/50 x 2n = 4n



实验仪器设备及方法

      吉源生物采用配置紫外激光的Sysmex-Partec CyFlow 倍性分析仪,搭配Sysmex CyStain DAPI倍性分析试剂盒,在2min即可完成一个样本的检测,为您提供高效、准确的检测结果,形成可靠数据,出具专业报告。实验步骤如下:


 




      使用Sysmex-Partec原厂倍性分析试剂和CellTrics过滤器,仅需要:

      1.裂解

      2.染色

      3.上机

      三步,2分钟内完成倍性分析实验。









                                                               


      Sysmex-Partec  CyFlow Ploidy Analyser            05-5002 CyStain UV Precise               3.5mL流式管以及多种规格CellTrics滤嘴


部分实验结果展示


拟南芥倍性检测




凹头苋种子倍性检测



黄精倍性检测


罗非鱼倍性检测




白菜型油菜倍性检测





样品准备

植物样品准备:叶片的新鲜程度直接影响实验结果。由于次生代谢产物的影响,会导致信号峰过宽,甚至检测不到信号峰的情况。嫩叶的选择要选取新鲜、完全舒展开、无虫咬、无枯萎、分裂不活跃的部位实验结果。

鱼类样品准备:大鱼可以取血液样本检测,或者取鱼组织检测,切取0.5cm2大小的新鲜鱼肉即可。

贝类样品准备:贝类大样本可以直接撬开贝壳,取贝的新鲜组织作为样本。贝类幼苗需要收集刚孵化2-3天内的浮游状态的幼苗。




如有实验服务需求,请联系我司,我们将为您提供准确、可靠的实验解决方案!

联系人:郭经理 13380084392  guoyong@geneunion.com

             姜经理 15602309098 jiangyan@geneunion.com





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